己糖激酶法测定血糖的干扰因素初析

２０１０年１０月　４９　生化分析仪与血气分析仪对静脉血电解质检测差异分析　董明国　石应元’叶青跃’杨明建　摘要：目的：采用生化分析仪与血气分析仪监测静脉血电解质结果的差异，为临床检测方法选择提供参考。方法：选择１２０．ｇ本院体　检中心体检志愿者，采集静脉血，分别采用生化分析仪及血气分析仪检测静脉血钠、钾、氯、钙离子浓度，分析两种检测方法检测电解　质浓度的差异。结果：血气分析仪检测静脉血钠、钾离子水平高于生化分析仪，两种检测方法氯、钙离子浓度无显著差异。结论：血气分　析仪检测静脉血钠、钾离子浓度存在较大偏差，在临床检测中要谨慎应用。　关键词：生化分析仪；血气分析仪；静脉血；电解质　中图分类号：Ｒ９２７．３　文献标识码：Ｂ　文章编号：１００６－０９７９（２０１０）２０－－００４９—０１　生化分析仪及血气分析仪是临床生化、血气分析等检测项目　常用的仪器，两种仪器在部分检测项目上是相互重合的，如电解　质等检测应用两种仪器都可以进行，不用的检测手段对检测结果　可能存在着影响，进而影响临床治疗，本文就两种检测方法检测　静脉血钠、钾、氯、钙离子等电解质存在的差异进行探讨，为临床　选择检验方法提供参考。　１材料与方法　＃：表示同血气分析仪检测相比Ｐ＜０．０５　３讨论　１．１标本来源：选择本院体检中心成年体检者１２０人，其中男性　２９例，女性３ｌ例，年龄２４～５１岁，平均３５．２岁，患者人选后采集　空腹静脉血标本６ｍｌ，分两份肝素钠抗凝管保存标本，分别用于　生化分析仪检测及血气分析仪检测，标本采集过程严格按照《全　国临床检验操作规程》关于静脉血标本采集相关规范，所有患者　对检测项目知情同意。　１－２检测方法：血气分析仪检测使用ＧＥＭ一３０００型血气分析仪（美　国生产），检测质控采用该公司配套质控品，检测试剂采用该公司　配套一体化检测试剂包，生化分析仪检测采用雅培公司，Ａｅｒｏｓｅｔ一　２０００，型全自动生化分析仪（美国生产），检测质控采用该公司配　套质控品，检测试剂采用该公司配套检测试剂，检测过程严格按　照仪器使用说明书及试剂使用说明书进行。　１．３统计学方法：数据处理采用ＳＰＳＳ１７．０中文版统计学软件进　行分析，统计学方法采用方ｔ检验，检验水准　＝Ｏ．０５，Ｐ＜０．０５认为　具有统计学意义。　２结果　血气分析仪检测静脉血钠离子及钾离子浓度高于生化分析　仪检测结果，血气分析仪检测静脉血氯离子及钙离子浓度同生化　分析仪检测结果无差异。　表１两种检测方法检测静脉血电解质离子浓度比较（ｍｍｏｌ／Ｌ）　静脉血电解质浓度检测是临床诊断、治疗及病情评估的常用　检测项目，电解质的检测方法较多，自动血气分析仪及自动生化　分析仪都可以用于检测静脉血电解质各种离子浓度，血气分析仪　检测相对比较快捷，而生化分析仪检测过程耗时较长，有研究显　示，两种检测方法对检测结果存在不同的影响，纪小霞等人采用　两种方法检测静脉血、动脉血的钾离子水平发现ｌ１１，血气分析仪检　测的结果钾离子水平高于生化分析仪，并且推测可能是因为检测　过程的抗凝剂溶血等因素影响。刘光明等人的研究也证实，采用　血气分析仪检测静脉血生化指标，血钾离子检测浓度及二氧化碳　分压高于生化分析仪，其考虑可能由于检测标本的处理方法不同　及放置时间等因素影响检测结果。我们采用两种方法检测发现，　采用血气分析仪检测静脉血电解质离子浓度时，钾离子浓度及钠　离子浓度均高于生化分析仪检测结果，在检测标本采集及保存过　程两种检测方法无差别，可消除标本条件造成的影响，因为我们　分析，可能两种检测方法的检测原理上的差别造成检测结果差　异，生化分析仪检测采用的是离子选择电极法，血气分析仪检测　采用直接电位法口。检测方法灵敏度及敏感度的差异可能是检测　结果差异的主要原因。生化分析仪检测质控系统相对较严格　，是　临床检测静脉血电解质的经典方法，因此对于需要严格检测离子　浓度的标本，如尿毒症病情的监测、治疗效果的评估等仍然应优　先选用，而血气分析仪检测相对便捷、快速，对于紧急情况下的疾　病筛选及病情评估可酌情使用。　参考文献　【１】纪小霞，陈伟霖，吴阿阳．血气分析仪与生化仪测定钾、钠离子的　比较　．检验医学与临床，２００９，６（２１）１８２３—１８２４．　【２】刘光明，黄小兵，李健茹．血气分析仪与生化分析仪相同检测项　目的比较分析『Ｊ］．海南医学，２０１０，２１（８）：１０２—１０３．　武汉科技大学附属天佑医院检验科（４３ｏ０６４）　２０１０年８月２４日收稿　【３］包安裕，李艳．床边检测设备与全自动生化仪测定血电解质及代　谢物的比较ｆＪ］．现代检验医学杂志，２００８，２３㈤：８１—８３．　［４吕赛平，４］伍志杰，邹学森．自动生化分析仪精密度性能的评价『Ｊ］．　现代检验医学杂志，２００７，２２（４）：４８—４９．　己糖激酶法测定血糖的干扰因素初析　尤德宏’张根兴　吴杭源　邓历’　关键词：己糖激酶法；测定血糖干扰　中图分类号：Ｒ４４６．１　文献标识码：Ｂ　文章编号：１００６－－０９７９（２０１０）２０—００４９—０２　目前临床实验室使用的测定血液葡萄糖的方法主要有葡萄　糖氧化酶法（ＧＯＤ）和葡萄糖己糖激酶法（ＨＫ）。ＧＯＤ方法的第一　步反应相当特异，第二步特异性较差；而ＨＫ方法由于反应与体　内正常代谢途径中存在的反应十分相似，两步酶催化反应皆非常　特异，同时此法抗干扰能力强，灵敏度和准确性好，是国际上公认　的参考方法。　考虑到ＧＯＤ法的干扰因素较多【　１且我院住院病人中高黄疸　比例较高，我科采用ＨＫ法检测血液葡萄糖；但在实际工作中我　无锡市传染病医院（２１４０００）　２０１０年８月２１日收稿　们发现，在一些严重机体损伤性疾病时，己糖激酶法测定血糖也　会受到一定的干扰。　我院检验科生化仪为ＯＬＹＭＰＵＳ公司ＡＵ５４００生化分析仪，　试剂为日本第一化学株式会社己糖激酶法测定试剂盒，采用　３４０ｎｍ和３８０ｎｍ双波长终点法测定。在日常工作中，我们观察到　少数病例血糖的检测结果与临床有所偏差并且排除了实验室的　误差，我们意识到ＨＫ法可能存在额外的干扰因素后，便开始主　动考察其影响因素：每份标本除测定葡萄糖外，还同时测定其他　２０余项常用生化指标，记录各项测定的结果。　通过观察３４０ｎｍ和３８０ｎｍ双波长测定葡萄糖的时间反应曲　内蒙古中医药　线，我们发现随着血清胆红素浓度的增加，对葡萄糖测定的干扰增　激酶法测定血糖产生干扰的可能是与胆红素相伴随的某些病理　大，不同胆红素浓度时的葡萄糖测定时间反应曲线有所不同，当血　代谢产物，而且这些物质的浓度与胆红素浓度的相关性比较强，　糖浓度接近正常参考值下限时，干扰强度有时会大于血糖的浓度。　也可能是其他器官损伤产生的一些异常代谢物质。　把加入Ⅱ试剂后反应体系吸光度最高值与最低值的差值换　己糖激酶法测定血糖是利用ＮＡ　一ＮＡＤＨ系统在３４０ｎｍ波　算成血糖的浓度，我们看到随着胆红素浓度的增加，血糖实测值　长的吸光度变化来完成的，这些物质可在瞬间消耗掉试剂盒中含　与真值的差加大，也就是胆红素对血糖测定的干扰增大。胆红素　有ＮＡＤＨ，使吸光度下降到接近于零，而且在某些患者中仍将利　浓度与这个血糖浓度的差值的相关系数为０．９０２，将其对胆红素　用一部分测定反应产生的ＮＡＤＨ，这使测定的时间反应曲线在峰　浓度进行回归分析，得到的回归方程为Ｙ＝１４．３Ｘ＋７８．２，即当胆红　底滞留几秒后才开始升高。此外，由于某些病理情况，丙酮酸和乳　素浓度达到８０ｐ￣ｍｏｌ／Ｌ左右时，在统计学上对已糖激酶法测定葡　酸代谢增强时，它会利用ＮＡ　一ＮＡＤＨ系统作为共同底物，形成　萄糖已开始产生干扰。但对于那些单纯梗阻性黄疸患者，当其胆　竞争性抑制，这可能是在那些非胆红素增高疾病患者中观察到的　红素浓度达到３００ｐａｎｏｌ／Ｌ时，对己糖激酶法血糖测定仍没有产生　对血糖测定产生慢反应干扰的原因。有文献报道［句，在试剂中加入　干扰，这说明对己糖激酶法测定血糖产生干扰的是与胆红素相伴　抑制副反应的成分后，可以解决反应达不到顶点就开始下降（慢　随的一些病理代谢产物或胆红素，而且这些物质的浓度与胆红素　反应干扰）的问题。　浓度相关性比较强，也就是说，胆红素浓度可以作为一个是否对　参考文献　血糖测定产生干扰的指示物质。后又测定了十几例严重肺部感　【ｌ】李秋荣，李建军，张保才．葡萄糖测定中若干干扰因素的消除【Ｊ】．　染、肝脏肿瘤、肝硬化等无胆红素升高疾病患者，发现这些患者体　临床检验杂志，１９９３，１　１（４）：１９３　内对血糖测定产生干扰的是一些慢反应物质，这时血糖与试剂的　【２］叶应妩，李健斋，王玉深，主编．临床实验诊断学【Ｍ】．上册・人民　反应在到达终点之前开始下降，这时通常伴有一种或几种酶的异　卫生出版社，１９８９；４４６　常增高。　【３］陈秀明，等．现代临床生化检验学【Ｍ】．人民军医出版社，２００１．　己糖激酶法是目前国际上公认的测定葡萄糖的参考方法，反　【４】韩志钧，等．临床化学常用项目自动分析法【Ｍ】．辽宁科学技术出　应速度快，它的两步反应均十分特异，据报道这种方法的抗干扰　版社．１９９５．　能力强，灵敏度高、准确性好，轻度溶血，脂血，黄疸，维生素Ｃ，及　【５］Ａｓｈｗｏａｈ　Ｌ，Ｇｉｂｂ　Ｉ，Ａｌｂｅｒｔｉ　ＫＧ，ｅｔ　ａ１．ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａ　ｐｏｒｔａｂｌｅ　一些抗凝剂基本不产生干扰　。　ｐｈｏｔｏｍｅｔｒｉｃ　ｓｙｓｔｅｍｆｏｒ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇｇｌｕｃｏｓｅ　ｉｎｗｈｏｌｅ　ｂｌｏｏｄ【Ｊ】．Ｃｌｉｎ　本实验观察到当胆红素浓度达到８０１￣ｍｏｌ／Ｌ时，在统计学上　Ｃｈｅｍ，１９９２，３８（８）：１４７９．　对己糖激酶法测定葡萄糖产生干扰，这与已有的报道２７０１ｘｍｏｌ／Ｌ　【６］王连明，辛晓敏，刘晓民，于永光．血糖测定的影响因素研究【Ｊ】．中　Ｈ，甚至４３Ｏ岫０ｌ，Ｌ．翻的无干扰胆红素浓度有所差别，这说明对己糖　国实验诊断学杂志，２００６，１０（１１）：１３４５．　抗脑衰胶囊中何首乌含量测定方法的研究　魏俊艳　于秋来　摘要：日的：建立抗脑衰胶囊中何首鸟的含量测定方法。方法：以乙腈一水（１５：８５）为流动相，检测波长为３２Ｏｈｍ，流速为１．０ｍｌ／ｍｉｎ，　进样量为２０ｕｌ。结果：使用高效液相色谱法可以准确有效地测定抗脑衰胶囊中２，３，５，４＇－四羟基二苯乙烯一２—０一Ｂ—Ｄ一葡萄糖苷的含　量。结论：该方法在０．１０１４８～０．８１１４８４ｍｇ／ｍｌ的浓度范围内线性关系良好Ａ＝８３５３．２１Ｃ＋３．５５６６（ｒ＝０．９９９９），平均回收率为１００．２％，相对　标准偏差（ＲＳＤ）＝Ｏ．７１％，方法准确，适用于抗脑衰胶囊中何首鸟的含量测定法。　关键词：抗脑衰胶囊；何首鸟；高效液相色谱法　中图分类号：Ｒ２８４．２　文献标识码：Ａ　文章编号：１００６－０９７９（２０１０）２０－００５０－０２　抗脑衰胶囊收载于中成药成方制剂第十六册［１１。含有人参、制　溶液，再以流动相制成每ｌｍｌ含０．４ｍｇ的溶液，作为对照品溶液。　何首乌、党参、黄芪、熟地黄、山药、丹参、枸杞子、白芍、远志、茯　供试品溶液的制备：取本品装量差异项下的内容物，混匀，取　神、石菖蒲、葛根、酸枣仁、麦冬、龙骨（粉）、香附、菊花、卵磷脂、维　０．６ｇ，精密称定，置２５ｍｌ棕色量瓶中，精密加入稀乙醇２０ｄ，称定重　生素Ｅ、黄芩等二十一味中药材，具有补肾填精，益气养血，强身　量，超声处理３０分钟，放冷，再称定重量，用稀乙醇补足减失的重　健脑的功效，用于因肾精不足，肝气血亏所引起的精神疲惫，失眠　量，摇匀，滤过，取续滤液，用微孔滤膜（０．４５１ｘｍ）滤过，取滤液５ｍｌ，　多梦，头晕目眩，体乏无力，记忆力减退等，对神经衰弱、老年性痴　置１０ｍｌ棕色量瓶中，用流动相稀释到刻度，作为供试品溶液。　呆、脑血栓后遗症等疗效显著。原标准中无主要药材的含量测定　３方法学考察　方法，本试验参照《中国药典￣２ｏｏ５年版一部何首乌的含量测定项　３．１辅料干扰试验：按抗脑衰胶囊处方和制法，依法制成缺制何首　１２１，用高效液相色谱法测定２，３，５，４　一四羟基二苯乙烯一２—０一Ｂ—　乌的阴性抗脑衰胶囊，并按样品溶液制备方法制备缺制何首乌的　Ｄ一葡萄糖苷的含量，作为控制本品的质量依据，结果该方法测得　阴性对照品溶液，吸取２Ｏ　，注入液相色谱仪，测定，结果在与　准确、可靠。　２，３，５，４＇－四羟基二苯乙烯一２一Ｏ—ｐ—Ｄ一葡萄糖苷相应的保留时间　１仪器与试药　出峰处无干扰峰，表明本品的其他药材成分对２，３，５，４＇－四羟基　１．１仪器：高效液相色谱仪：Ａｇｉｌｅｎｔ　ｌ１００　二苯乙烯一２—０一ｐ—Ｄ一葡萄糖苷的含量测定无干扰。　１．２试药与试剂：２，３，５，４＇－四羟基二苯乙烯一２—０一Ｂ—Ｄ一葡萄糖苷　３．２线性范围：精密称取２，３，５，４＇－四羟基二苯乙烯…２　０　Ｂ—Ｄ一　对照品为中国药品生物制品检定所提供；抗脑衰胶囊由石家庄制　葡萄糖苷对照品５０．７４ｒａｇ，置２５ｍＬ量瓶中，加稀乙醇８Ｏｒａｌ，超声　药有限公司生产；乙醇为分析纯。　处理１０分钟，放冷，加稀乙醇至刻度，摇匀。分别精密吸取Ｏ…５　１　２方法　２、３、４ｍｌ置ｌＯｍｌ瓶中，用流动相稀释至刻度。按上述条件及方法　２．１色谱条件　色谱柱：大连依利特ＫｒｏｍａｓｉｌＣ１８（２００ｍｍｘ４．６ｍｍ　进行测定。回归方程：Ａ＝８３５３．２１Ｃ＋３．５５６６，相关系数ｒ＝－０．９９９９。结　５１ｘｍ），流动相：乙腈：水（２０：８０　Ｖｎｒ）；检测波长为３２０ｎｍ；流速：　果表明在２，３，５，４　一四羟基二苯乙烯…２　Ｏ　Ｂ—Ｄ一葡萄糖苷对照　１．Ｏｍｌ／ｍｉｎ；进样量：２０ｔｄ。　品浓度为０．１０１４８—０．８１１４８４ｍｇ／ｍｌ范围内与峰面积积分值呈良好　２．２测定方法：对照品溶液的制备：精密称取２，３，５，４　一四羟基二苯乙　的线性关系。　烯－２．０＿Ｂ＿Ｄ＿葡萄睹苷对照品适量，加稀乙醇制成每ｌａｄ含２ｍｇ的　３－３精密度试验：取本品供试品溶液，连续进样６次，测定其相对　河北御芝林生物科技有限公司（０５２３６０）　保留时间的ＲＳＤ％为０．７９％，其峰面积的ＲＳＤ％为０．５５％。表明此　・石家庄宇惠制药有限公司（０５２３６０）　方法精密度良好。　２０１０年８月２１　１３收稿　３．４回收率考察：精密称取已知含量的样品（批号：