正交试验法优选决明子的提取工艺

山东医学高等专科学校学报2010,32(2):105󰀁108Journal󰀁of󰀁Shandong󰀁Medical󰀁College

正交试验法优选决明子的提取工艺

陆赛卫,袁󰀁华

1

2

(1苏州玉森新药开发有限公司,江苏苏州215125;山东济宁市药检所,山东济宁272100)󰀁󰀁摘要:目的󰀁研究决明子中大黄酚的提取工艺。方法󰀁采用正交试验法进行优选,高效液相色谱法测定大黄酚含量。结果󰀁乙醇浓度、提取次数对提取有显著性影响。结论󰀁最佳提取工艺为决明子粗粉,用75%乙醇回流提取2次,每次10倍量溶剂,提取1h。

关键词:决明子;正交试验;大黄酚;提取工艺;高效液相色谱法󰀁󰀁doi:10.3969󰀁j.issn.1674󰀁0947.2010.02.010󰀁󰀁中图分类号:R282.4󰀁󰀁󰀁文献标识码:A

文章编号:1674󰀁0947(2010)02󰀁0105󰀁04

SELECTIONOFOPTIMUMEXTRACTIONPROCESSFORSEMEN

CASSIAEWITHORTHOGNALDESIGN

LUSai󰀁wei,YUANHua

(SuzhouYusenNewMedicineDevelopment,CO.LTD,Suzhou,Chnia215125)

Abstract:ObjectiveTostudytheextractionprocessforthechrysophanolinSemencassiae.MethodsTheop󰀁timumextractionprocesswasselectedwiththeorthogonaldesign.ThecontentofchrysophanolwasdeterminedbyHPLC.ResultsThealcoholconcent󰀁rationandtheextractiontimeswasfactorinthetest.ConclusionTheoptimumextractionprocessisasfollows:adding10timeamountof75%alcoholintomaterialsandrefluxingandextractingfor2times,1heverytime.

Keywords:Semencassiae;OrthogonalDesign;chrysophanol;extractionprocess;HPLC󰀁󰀁决明子为豆科植物决明CassiaobtusifoliaL.或小决明CassiatoraL.的干燥成熟种子。味甘、苦、咸,性微寒,具有清热明目,润肠通便之功能,用于目赤涩痛,羞明多泪,头痛眩晕,目暗不明,大便秘结。决明子主要化学成分为蒽醌类,以大黄素(emodin)、大黄素甲醚(physcion)、芦荟大黄素(alone󰀁emodin)、大黄酚(chrysophanol)、决明素(Ob󰀁tusin)、决明子素(Obtusifolin)、橙黄决明素(Auran󰀁tio󰀁Obtusin)等。现代药理研究结果表明,决明子具有抗菌、抗真菌、降压、降血脂、抗血小板聚集、保肝、

[2]

泻下等作用。因此,决明子极具开发应用价值。为了进一步利用决明子,本文采用正交试验法,以决

[1]

明子大黄酚的产率为评价指标,对提取工艺及条件进行优选试验,并采用酸水解法和溶剂萃取法将决明子醇水提取液粗分成脂溶性部位(主含蒽醌衍生物)和水溶性部位(主含蒽醌甙类物质),从而为决明子活性成分的提取富集和开发生产提供参考。1󰀁仪器与试药

1.1󰀁仪器󰀁岛津高效液相色谱仪,LC󰀁10ATvp溶剂输送泵,SPD󰀁10Avp紫外可见检测器;瑞士MET󰀁TLER万分之一及十万分之一电子天平。

1.2󰀁试药󰀁大黄酚对照品,购自中国药品生物制品检定所,批号:110796󰀁200310,供含量测定用。1.3󰀁试剂󰀁甲醇为HPLC级(MECRK),水为重蒸馏水,磷酸为分析纯级,氯仿为分析纯级,盐酸为分析纯级。

2󰀁方法与结果

2.1󰀁正交试验设计󰀁以决明子中大黄酚的含量为考核指标,对决明子的粒度进行了考察,结果发现决

󰀁作者简介:陆赛卫(1979󰀁),男,江苏省启东市人,2003年毕业于南

京中医药大学,主要从事中药现代化研究,已发表论文1篇。

󰀁收稿日期:2009󰀁10󰀁18

󰀁󰀁106󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁山东医学高等专科学校学报󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁2010年32卷

明子粉碎后的提取效率明显高于不粉碎的提取效率。进而又对提取溶媒进行了考察,结果发现醇提的提取效率明显高于水提的提取效率。所以,结合文献和预试验结果,最终选用L9(34)正交试验(见

表1)进一步对影响决明子乙醇提取因素(A)醇浓度(%)、(B)加醇量、(C)提取时间、(D)提取次数等进行考察,以确定最佳乙醇提取工艺条件。正交试验结果见表2。

表1󰀁决明子提取因素水平表

因素水平

123

A醇浓度(%)

556575

B加醇量(倍)

6810

C提取时间(h)

0󰀂51.01.5

D提取次数(次)

321

2.2󰀁含量测定

2.2.1󰀁色谱条件󰀁色谱柱为Shim󰀁packCLC󰀁ODS(6.0mmID󰀂150mm),流动相为甲醇󰀁0󰀂1%磷酸

溶液(85 15),柱温25!,流速1mL󰀁min,检测波长254nm;进样量:20󰀁l。见图1。

B决明子样品

图1󰀁大黄酚对照品及决明子样品HPLC

󰀁󰀁2期󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁陆赛卫,袁华:正交试验法优选决明子的提取工艺󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁107󰀁󰀁

2.2.2󰀁大黄酚标准曲线制备󰀁精密称取大黄酚对照品4.96mg,置100mL棕色容量瓶中,加甲醇使溶解,并定容至刻度,摇匀。分别吸取该溶液0󰀂4、0󰀂8、1.6、2.4、3.2、4.0mL,置10mL容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,精密吸取上述溶液各20󰀁L,注入高效液相色谱仪,各浓度溶液分别测定2次,得峰面积积分值。以大黄酚对照品进样量为横坐标,峰面积积分值为纵坐标,绘制标准曲线,其回归方程为:

Y=970󰀂252+2615289.646X,r=0󰀂9999。

供试品在0󰀂03968~0󰀂39680mg范围内,大黄

酚的峰面积与进样量呈线性关系。

2.2.3󰀁供试品溶液制备󰀁分别取决明子粗粉5g,置100mL圆底烧瓶中,按表2设计的9种工艺采用加热回流提取,放冷至室温,提取液过滤,润洗残渣,滤液最后定溶至200mL,含决明子0󰀂025g󰀁mL,摇匀,即得。精密移取1mL,蒸干,加10%盐酸溶液30mL,置水浴中加热水解1h,立即冷却,用氯仿振摇提取3次,每次30mL,合并氯仿液,回收溶剂至干,残渣用甲醇溶解,转移至10mL容量瓶中,并稀释至刻度,摇匀。经0󰀂45󰀁m微孔滤膜过滤,取续滤液进行大黄酚的含量测定。结果见表2。

表2󰀁决明子提取正交试验表

󰀁因数󰀁序号123456789K1K2K3R

A1112223332.2432.4172.4670󰀂224

B1231231232.3832.3472.3970󰀂050

C1232313122.3902.3932.3430󰀂050

D1233122312.5002.5132.1130󰀂400

大黄酚含量(mg󰀁g)

2.392.371.972.182.482.592.582.192.63

表3󰀁决明子含量方差分析

因素ABCD

偏差平方和0󰀂0820󰀂0040󰀂0050󰀂310

自由度2222

F20󰀂500*1.0001.25077.500

*

定最佳工艺组合为A3B3C2D2。即最佳工艺为:药材

F临界值19.00019.00019.00019.000

加10倍量75%乙醇提取2次,每次提取1h。2.4󰀁验证试验󰀁优选出最佳提取工艺后,按照上述最佳条件进行验证试验,测定大黄酚的含量,以确定

试验的重复性和准确性。结果大黄酚含量平均值2.65mg󰀁g,RSD=1.33%。验证试验结果说明该工艺稳定可行。见表4。

表4󰀁决明子醇提验证试验结果表

试验次数

123

大黄酚含量(mg󰀁g)2.652.682.61

2.65

1.33

平均大黄酚含

(mg󰀁g)

RSD%

󰀁󰀁*P<0󰀂05

2.3󰀁正交试验结果与方差分析󰀁见表2、3。以大黄酚含量为指标,直观分析结果表明(见表2),影响

决明子提取的因素中,重要性依次为D>A>B=C,方差分析结果表明(见表3,B为误差项),B因素无显著性影响,A、D因素有显著性影响,最佳组合为A3B3C2D2。综合以上分析结果,联系生产实际,确

󰀁󰀁108󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁山东医学高等专科学校学报󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁2010年32卷

3󰀁讨论

决明子为成熟的种子,质地比较坚硬,经稍微粉碎后,细胞壁被破碎,有助于大黄酚的提取。决明子中含较多羟基蒽醌类化合物,经酸水解后变为大黄

[3]

酚、大黄素甲醚、决明素等。据文献报道:大黄酚水解前含量约为水解后的1󰀁50。因此本试验对样品处理采用酸水解󰀁氯仿提取。蒽醌类化合物易溶于乙醇,难溶于水,本试验证明了这一点。通过正交试验结果直观分析和方差分析得出,决明子提取的最佳工艺条件,用10倍量75%乙醇回流提取2次,每次1h,其中乙醇浓度、提取次数是影响提取率的

主要因素,其余因素影响不显著。

本试验通过正交法对决明子的提取条件进行优选,按最佳工艺进行验证试验,大黄酚提取率高、稳定性好,适合于大生产。

参考文献

[1]󰀁国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].北京:化学

工业出版社,2005:98.

[2]󰀁国家中医药管理局∀中华本草#编委会.中华本草[S].上海:上

海科学技术出版社,1996:841󰀁848.

[3]󰀁曹爱民,沙明,孟淑智,等.高效液相色谱法测定决明子中大黄

酚的含量[J].中国中药杂志,1997,22(2):701󰀁704.

(编辑󰀁胡怀富)

提高门诊导医护士交流沟通的技巧

艾󰀁苗

(临沂市妇幼保健院,山东临沂276000)

󰀁󰀁中图分类号:R473󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁文献标识码:B󰀁󰀁关键词:导医护士;交流沟通;技巧

doi:10.3969󰀁j.issn.1674󰀁0947.2010.02.011

导医护士是指介绍、引导或帮助病人就诊的护理人员,更是医院的形象使者,肩负着沟通医患关系,展现医院形象的重任。随着现代医学模式和护理观念的转变,人们的健康观念不断更新,就医观念及就诊需求心理也发生了很大的变化。为了适应这一需要,门诊导医护士必须树立以人为本的服务理念,贯彻落实医院管理的规范要求,优化门诊服务流程,方便病人就诊,提高医疗服务质量,营造和谐医患关系,塑造医院形象,打造医院品牌,为此,门诊导医护士善于与病人沟通是至关重要的。因此,护士有必要掌握一些语言沟通的技巧并在门诊工作中加以运用,从而建立良好的护患关系。

1󰀁提升导医护士的自身素质

1.1󰀁注意自身形象󰀁护士的形象不只是指身材、相貌和音色等客观因素,还指护理人员的仪容、仪表、姿态、表情等主观要素。护士的仪表、姿态以及一言一行、一举一动都直接影响病人的情绪,护士的自身

文章编号:1674󰀁0947(2010)02󰀁0108󰀁02

素质对建立良好的护患关系起着事半功倍的作用,其仪表应以庄重典雅为美;服饰应整洁合体,给人以纯洁明快文雅之感;衣扣要扣齐(不可粘胶布、别大头针)、衣领、腰带、袖口、衣边要平展整齐,无油渍、尘污,原则上内衣不外露,袜子颜色协调,给人以端庄、稳重、平静之感,加以端庄的举止、优雅的谈吐,能即刻唤起患者的美感,给患者留下良好的第一印象。

1.2󰀁注意礼貌用语󰀁首先选择适当的称呼,恰当的称呼往往是护理人员与病人建立良好关系的起点。与病人交谈,要以亲切的目光迎送病人,以专注的眼神与病人交谈,从而达到建立良好的护患关系、使病人压抑的心情得以释放的目的。同时,病人可以从双方沟通中获得被尊重、被理解、被关怀的满足感。因此,无论病人以何种心态就诊,都应该用语言与病人沟通以解除其思想顾虑和负担,增强战胜疾病的信心。

2󰀁不同疾病患者的语言沟通

2.1󰀁急诊病人的语言沟通󰀁重病人、意识不清、外伤病人就诊时,门诊导医护士应处处体现急诊病人

󰀁作者简介:艾苗(1976󰀁),女,山东省临沂市人,1996年毕业于潍坊

医学院,主管护师,现从事临床护理工作,已发表论文3篇。

󰀁收稿日期:2009󰀁11󰀁16

的应急能力,沉着、迅速、敏捷、果断地采取措施,启动绿色通道,迅速而镇静的向家属询问有关情况,最短时间内将病人送至抢救室或诊室,与抢救护士或诊室大夫交接病人,并协助做好家属的安抚工作。