农药室内生物测定技术与方法

农药室内生物测定技术与方法张宗俭农药室内生物测定技术与方法——～：■■张宗俭一ｉ，、．¨刁、７（沈阳化工研究院农药生物测定中，ｔＬ，，沈阳１１００２１）一、农药生物测定的含义及其用途农药生物测定是指利用靶标生物（昆虫、螨类、病原微生物、线虫、植物等）的活体或离体器官、组织、细胞或其代谢物等（如酶、蛋白质等）为试材，测试或鉴别生物活性物质的类型、反应症状或其活性大小的一种方法。简单地说，农药生物测定技术就是利用靶标生物等对药剂的反应来鉴别农药毒力或药效的一种技术。农药生物测定主要包括杀虫剂（杀螨剂）、杀菌剂（杀线虫或抗病毒剂等）、除草剂、杀鼠剂以及植物生长调节物质等的生物测定技术。它涉及靶标生物、测试物质（药剂）、反应症状及强度、测试环境条件等多方面的因素。一个好的生物测定技术或方法应具备易于操作、结果反应灵敏、重现性好、且使用物质的剂量与反应之间有良好的相关性。农药生物测定技术与农药的使用和开发同时产生，经过长期不懈创新、完善和发展，已经成为研究生理活性物质、靶标生物以及反应强度三者关系的一项专门技术，被广泛应用于新农药的筛选以及作用特性和应用技术评价等研究之中。纵观目前农药生物测定的研究概况，室内农药生物测定技术主要应用于以下几个方面：１．刨制农药生物活性筛选研究：随着农业生产的发展和人们对地球环境生态和人类健康等的要求不断提高，高效、低毒、环境友好型新农药的开发应用给人类社会和生产企业带来巨大的效益，但同时也由于新农药开发的难度与费用日益增加，如何利用生物测定技术快速高效地筛选新化合物，并准确评价其生物活性以及应用技术，估测其农药生物评价技术报告会市场前景及将来在市场上的占有率和利润额，是决定其创制农药研究成功与否的关键。利用生物测定方法研究同一类结构或同一作用类型化合物的化学结构与生物活性关系的规律（ｓＡＲ）以及与靶标作用位点的结合关系，为定向创制新农药和计算机辅助设计新化合物提供基础数据和理论依据。生物活性筛选被称为农药创制的“眼睛”．对新农药开发研究起着举足轻重的作用。２．研究农药的理化性质、￥，ＪＮ力ＮＴ类型、加工方法与其生物活性及其安全性之间的关系，为剂型加工和生产应用服务：农药制剂的加工及助剂的选择和应用与其有效成分的生物活性、安全性以及应用技术和田间使用效果密切相关，好的加工剂型与工艺不仅可改善有效成分的生物活性，增加对保护作物的安全性，并且可以减少对生态环境的污染。３．测定或比较不同农药对靶标生物或测试对象（昆虫、螨类、病原菌、杂草、鼠类等的毒力或药效，指导生产中农药的正确选择和应用。４．研究农药的作用方式、生理效应以及对植物的影响：杀虫剂有触杀、内吸、胃毒、不育、拒食、忌避、引诱等作用；杀菌剂是属杀菌作用（影响生长、萌发或附着胞的形成，引起菌体细胞膨胀、原生质体和线粒体瓦解以及细胞壁、细胞膜破坏等，如铜、汞制剂），还是抑菌作用（抑制菌体生命活动的某个过程，如许多有机农药，尤其是内吸杀菌剂）。杀菌作用表现多是影响菌体的生物氧化，表现为孢子不能萌发；抑菌作用多是影响菌体的生物合成，孢子萌发后芽管或菌丝不能继续生长。也可用于研究杀菌剂的化学防治原理，是属于保护剂、治疗剂或化学免疫剂。化学保护剂应在植物感病之前使用，杀灭病原菌或防止病菌入侵；化学治疗剂则在植物发病后早期使用，以阻止病害农药室内生物测定技术与方法张宗俭发展而使植物恢复健康；化学免疫剂则主要是提高或诱导植物的抗病性，使其免于发病（如乙瞵铝，噻瘟唑等）。除草剂的杀草谱确定，使用技术（苗前、苗后），作用方式或机理等研究也均离不开生物测定。５．研究有害生物的发育阶段（昆虫的卵、龄期等，病菌的发生入侵时期、侵染体状态等以及杂草的种群组成和发育时期）、生理状态（品：系、耐药性和生长情况等）以及环境条件（光照、温度、湿度、土壤水分、质地等）与农药药效的关系。以便正确制订使用时期、剂量以及施药方法等，做到科学用药，适时用药。６．筛选和测定农药混剂组合、配比以及农药增效剂。以提高药效，扩大防治谱、减少用药量、降低用药成本以及对环境的不良影响。７．测定、监测或预测有害生物对农药的抗性水平以及抗性发展，从丽克服或延缓抗性的发展，延长新品种的使用寿命、降低新农药开发研究风险。８．微量生物活性物质的定性、定量分析：利用生物测定技术以及特定化学物质的出现效应及其强度与其剂量的相关性，定性分析追踪生理活性物质的有无以及含量大小或者残留动态等。尤其是一些天然产物或新的特异性化学物质，在未建立化学分析方法之前，常利用灵敏度较高的生物测定方法进行定性、定量分析。９．测定农药对植物的药害症状和影晌程度、对非靶标生物（高等动物、天敌昆虫、土壤微生物等）的毒性以及影响。综上所述，农药生物测定及其应用范围十分广泛。随着农药科学及其农药工业的迅速发展，农药生物测定作为新农药创制和合理科学使用农药以及农药药理学、毒理学及环境毒理学等研究的重要手段，得到了极大的丰富和发展。国外大型农药研究机构不断投入资金和技术，发展、健全其农药筛选机构。改进筛选方法，模拟各种环境条件，农药生物评价技术报告会改进和强化其试验设备和仪器，建立国际性的农药大田试验网．提高和培训农药生测技术人员，以促进新农药的研制和开发。许多农药公司增设了高效快速筛选技术以及分子生物学和基因工程研究部门，以满足现代农药研究的需要。我国也于近年相继建成农药国家工程研究中心（沈阳、南开）和国家南：）亨农药创制中心（上海、南京、浙江、湖南基地），投入大量资金和经费，建立了较高水平的生测试验室，以适应我国创制农药发展的需要。但由于我国新农药创制起步晚，虽然在农药生测研究方面也做了许多工作，但就创制化合物活性筛选方面与国外发达国家相比差距仍然很大：就生测筛选的条件建设，仪器配置以及方法建立，尤其是标准化操作程序（ＳＯＰ—ＳｔａｎｄａｒｄＯｐｅｒａｔｉｏｎＰｒｏｃｅｄｕｒｅ）和ＧＬＰ（ＧｏｏｄＬａｂｏｒａｔｏｒｙＰｒａｃｔｉｃｅ）建立方面还需做很多努力；有关生测技术人员的培训以及创制农药研究体系的建设和运做等方面仍需加大投入力度，以确保创制农药研究的快速、健康发展。二、农药生物测定的基本原理和方法在农药生物测定研究中，靶标生物的种类、发育阶段和生理状态等对农药的毒力或药效影响很大；药剂本身的理化特性、加工剂型、助剂种类与含量等也影响药效：而测试环境条件对靶标生物以及靶标生物对药剂的反应程度也存在根大的影响。环境条件、供试药剂、靶标生物三者之间相互作用，相互影响。所以，在进行农药生物测定试验对，必须严格控制各种影响因子，以确保试验结果的可靠性，可比性以及重现性。在设计和进行农药生物测定试验研究时，必须掌握和了解以下基本原则：１．标准化靶标试材的选择及繁育：不同靶标生物对药剂的反应各不相同，原则上任何生物体或其活体器官、组织、细胞等均可以作为农药室内生物测定技术与方法张宗俭４５生测靶标选择或用于测试。在农药生物测定研究中，靶标生物的选择应具备以下几个条件：①在分类学上，经济上或地域上有一定代表性的昆虫、病菌或杂草等。②对药剂敏感性符合要求，且对药剂的反应以及程度便于定性、定量测定，且与剂量有良好的相关性。⑧易于移取、控制和进行试验操作。④易于大规模工业化培养、繁育和保存，以便保证终年供给。不园地区或季节的限制而影响试验的开展。⑤种群纯正，个体间差异小，生理标准均一。２．明确药剂的结构、组成及其有效成分含量：所有测试试验的物质均应是纯品或原药（原油或原粉），结构明确：若为制剂应了解确切的有效成分含量，若有添加剂和助剂也应了解其成分和含量：以保证试验的重现性。并且，应使用精密的施药机械和正确的使用技术，以确保靶标受试药量的准确性和均一性。３．严格控制的、相当均一的环境条件：农药生物测定大部分是测定靶标生物的反应程度（死亡率、抑制率等），随药剂荆量的变化关系。药剂剂量（或浓度）为自变量，对靶标死亡率或抑制率为因变量。在没有其它因子影响的情况下，二者里良好的正相关关系，其试验结果也便于测定和分析。而在生测试验中，环境条件（如光照、温度、湿度等）不仅影响靶标生物的生理状态，也影响药剂的吸收、输导以及毒力或药效的高低。所以在进行生测试验时，应严格控制测试环境，以保证所有处理在相对一致的环境下测试。室内试验可以在人工气候箱、光照培养箱、恒温、恒湿箱中进行。田间试验应选有代表性的田块，最好有相对控制的小气候环境（尤其是杀菌剂试验），田块平整，肥力均一，病虫草害分布均匀且有代表性，作物长势、管理条件等均力求一致，以减少试验误差。４．必须设立对照：由于生物的复杂性和易变性，常会产生一些难农药生物评价技术报告会以预料的结果，所以，正确设立空白对照，对于取得可信的试验数据非常重要。～般常用农药生物测定试验的对照设立有３种：①不作任何处理的空白对照。以了解供试靶标生物的自然死亡率、生物量变化等．消除供试生物本身的变化对测定结果的影响。②不含有效成分的对照。即除不含农药有效成分外，一切处理均与其它药剂处理一样进行，主要目的是了解溶剂、乳化剂、助剂等以及处理方法对测试靶标的影响。③标准药剂对照。即选择同类已知对测定靶标有明确影响的化含物或商品化品种作对照，以消除偶然因素的影响，同时也便于比较和评价未知供试化合物的活性。在新化合物筛选试验或其它长期进行的试验中，用于监测靶标生物的生理状态变化以及耐药性水平的变化趋势，以跟踪和消除不同批次试验间的误差。５．设置重复，随机排列：生物测定试验的对象是靶标生物，而靶标生物种群中个体之间的大小、生理状态以及耐药性等均存在一定的差异。在生测试验取样时，应有一定的数量，并设置重复，以保证其代表性和结果的可靠性。但重复也不能过多，应根据试验的目的和工作量确定重复次数。一般试验至少应重复３次，田间小区试验应重复４—５次。’其试验设置应用随机区组法排列，以控制处理间的误差，并便于对调查数据进行统计分析。６．应用生物统计的方法分析试验结果：对试验结果用生物统计工具进行比较和分析，对于消除试验误差，了解错纵复杂的大量数据之间的内在规律，揭示供试化合物与靶标之间的内在关系等非常重要。尤其是目前计算机的普及和许多生测统计软件的应用，使得生测试验的统计分析、数据处理和保存更加方便和快捷。三、杀虫剂的生物测定方法１．杀虫剂生物测定常用靶标昆虫农药室内生物测定技术与方法张宗俭４７２．杀虫剂毒力测定方法杀虫剂的毒力测定方法很多，根据试虫、供试化合物以及测定目的不同，可以选用不同的试验方法或自行设计试验方法和技术，常用的新化合物杀虫活性筛选方法和杀虫剂作用方式测定方法有以下几种：初步杀虫活性测定比较或筛选试验方法：这类方法主要用于确定或比较供试化合物是否具有杀虫活性及其活性高低，多用于筛选试验和毒力或药效比较试验。主要有３类常用方法：喷雾（粉）法：利用喷雾或喷粉装置，将定量的药剂直接喷布于盛４８农药生物评价技术报告会有目标昆虫及其饲料的器皿内，使药剂直接与昆虫或食料接触，然后在培养箱或观察室内定期观察记录昆虫的生长、发育和死亡情况，比较或确定化合物的毒力。这类试验对喷雾装置的要求较高，要求雾滴大小基本一致，喷雾均匀，单位面积上药剂沉积量一致。常用喷雾装置有履带式或天车式喷雾机、喷雾喷粉两用沉降塔、颇特喷雾器等。其特点是速度快、便于操作、用药量准确；但需特定设备。浸渍法：将一定数量的目标昆虫（用于净纱布袋或纱笼装起来），或将饲料植株、叶片或带虫叶片（如蚜虫、红蜘蛛等），直接浸润于一定浓度的药液中３—５秒钟，取出后用滤纸吸去多余药液，将试虫及饲料置于干净器皿中饲养，并补充新鲜饲料，观察、记录试虫死亡率。特点是快速、方便、不需特殊仪器、设备，但操作中人为因素影响大，用药量不够准确。饲料混药法：将一定量的药剂充分与试虫食料混匀，试虫取食时接触或摄入药剂而死亡。多用于贮粮害虫、家蝇、蜚蠊、蚊子或人工饲料饲养的昆虫的生物测定试验。上述方法比较粗放，主要用于判断化合物是否有杀虫活性，并初步比较其活性大小，多用于常规筛选研究。如目前大部分研究机构采用喷雾法或浸渍法筛选新化合物的杀虫活性。３．杀虫剂作用方式测定方法了解杀虫剂的作用方式，对于准确评价其杀虫活性以及正确有效地使用杀虫剂具有十分重要的意义。通常根据杀虫剂进入虫体的部位和途径，将杀虫剂可分为胃毒剂、触杀剂、熏蒸剂、内吸剂、忌避与拒食剂、不育剂、引诱剂等。椐其不同的作用方式可以选择或设计相应的生物测定技术。置童佳围型定垫！Ｑ堡垫ｈ墼！ｉＱ血：使供试药剂随食物～起被目标农药室内生物测定技术与方法张宗俭昆虫吞食进入消化道而发挥毒杀作用。常用方法有：，饲料混药饲喂法：如贮粮害虫测定等。无限量取食法≮培养基混药法：人工饲料饲喂的昆虫等，如果蝇。。土壤混药饲虫法：以金针虫、蛴螬、蝼蛄、地老虎等地下害虫，土地混药后接虫。ｒ一叶片夹毒法：利用喷粉（雾）或点滴法定量制做夹毒叶片。定量取食法＜ｌ液滴饲喂法：家蝇、果蝇、蜜蜂等舐食性昆虫。【、口腔注射法：难度大，很少使用。无限量取食法操作方便，易于大规模进行试验，但很难排除其它毒杀作用（如触杀、熏蒸等）的影响。定量取食法测试结果ＥＥ较准确，且便于对昆虫的取食药量进行定量分析，如夹毒叶片法是目前常用的测定胃毒作用的经典技术。筮苤往旦型定（！业！堂！堑！ｉ！生：药剂通过昆虫体壁进入虫体而产生毒杀作用——触杀毒力。其测定方法有直接施药法和局部施药法：ｒ喷粉或喷雾法：定量药液直接喷布至虫体。直接施药法＜浸渍法：筛选试验。蚜虫、螨等小型不活动昆虫。Ｌ浸玻片法：螨、蚜虫测定。ｒ药膜法（ｒｅｓｉｄｕａｌｆｉｌｍ）：爬行昆虫、卫生害虫。局部施药法Ｊ【点滴法（ｔｏｐｉｃａｌａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ）：用药精确、应用广泛。直接施药法常无法排除胃毒等的干扰，但主要为触杀作用。恿苤佳旦型定（￡！堡ｉｇ煎ｉ！！丝！ｉ！吐：测试杀虫剂从气孔或气门进入呼吸系统而引起昆虫中毒，．测定时应注意密闭以及温度、湿度的影响。常用方法二重皿法、广口瓶法、三角瓶法等：也可用钟罩、干燥农药生物评价技术报告会器等进行试验。内堕丝旦型室（！！§±盟ｉ！熟！ｉ塑２：内吸杀虫剂指通过植物根、茎、叶及种子等部位渗入植物内部组织，随体液传导至整株，而对害虫起很高毒效的化学物质。测定方法很多，也可以自行设计。如根系内吸、叶部内吸、茎叶内吸和种子内吸等。基宣往旦左式型庭：拒食、避忌、不育，激素等测定见有关资料。四、杀菌剂生测方法Ｉ．杀菌剂生测常用靶标病原菌的菌种及其选择杀菌剂生物测定主要是测试供试化合物对细菌、真菌或其它病原生物的作用大小或对植物病害发生、发展的控制作用。对其靶标的选择应注意：①在分类上具代表性的重要病害的病原菌；②菌种的纯菌株或品系；⑨容易培养和繁殖，致病力稳定。④便于试验操作和结果调查。根据地区、测试目的以及药剂的作用对象，选择靶标菌种，寄主植物及其培养方法。常用靶标有：中文名称拉丁学名马铃薯晚疫病菌ＰｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａＪｎｆｅｓｔａｎｓ水稻稻瘟病菌Ｐｉｔｉｃｕｌ８ｒｉａｏｒｙｚａｅ小麦赤霉病菌Ｇｉｂｂｅｒｅｌｌａｚｅａ水稻胡麻叶斑病菌幻曲ｌｉｏｂｏｌｕｓｍｉｙａｂｅａｎｕｓ玉米大斑病菌Ｈｅｉｍｉｎｔｈｏｓｐｏｒｉｕｍｔｕｒｃｉｃ∞梨黑斑病菌Ａ１ｔｅｒｎａｒｉａｋｉｋｕｃｈｉａｎａ黄瓜霜霉病菌Ｐｓｅｕｄｏｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａｃｕｂｅｎｓｉｓ葡萄霜霉病菌ｐｌａｓｍｏｐａＴ８ｖｉｔｉｃｏｉ８黄瓜白粉病菌８ｐｈａｅｒｏｔｈｅｃａｆｕｌｉｇｉｎｅａ番茄旱症病菌Ａｊｔｅｒｎａｒｉ８ｓｏｉ８ｎｉ黄瓜角斑病菌ＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓＩｌｉａｒｇｉｎａｌｉｓｐｖ．ｍａｒｇｉｎａｌｉｓ水稻白叶枯病菌Ｘａｎ曲ＯｍＯｎａＳｃａｍｐｅｓｔｒｉｓｐｖ．ＯｒｙＺ∞堡垫至塑兰塑型塞塾查皇查堡堡量堡翌小麦锈病菌Ｐｕｅｅｉｎｉａｓｔｒｉｉｆｏｒｍｉｓ小麦白粉病菌Ｅｒｙｓｉｐｈｅｇｒａｍｉｎｉｓ黄瓜灰霉病菌Ｂｏｔｒｙｔｉｓｃｉｎｅｒｅａ水稻纹枯病菌Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａｓｏｌａｎｉ２．杀菌剂生测试验方法离体试验：塑王莹筮造：平板法、悬滴法等。（ｉｎｖｉｔｒｏｔｅｓｔ）盒壹佥厦逵：①水平扩散法（抑菌圈法）②生长速率法③最低抑制浓度法（培养基稀释法）活体试验：吐丘量差这：以离体叶片或叶蝶为试材、测定杀菌（如ｖｉｖｏｔｅｓｔ）剂活性。坌筮这坠洼：盆栽条件下，模拟自然条件，接种并用药，测定其防效。离体试验方法快速、简便、容易操作、不需大型设备和人工气候室（仅涉及药剂与病原生物，不包括寄主植物），但测试结果与田间实际情况差异大，因有些化合物必须在植物体内活化后或通过改变寄主的抗病性而起防病作用，这些化合物在离体条件下不表现毒力。活体测定试验则包括病原生物、寄主以及药剂三者的统一体，所以活体筛选试验更接近于杀菌剂实际田间应用条件。并且，可以在控制条件下，研究杀菌剂的作用方式以及特性（保护、治疗、抗雨水冲刷、持效期等），试验结果重现性好，便于大规模进行新化合物筛选以及进行毒力比较研究。但这类试验对病原菌等要求严格，且需要较好的温室、接种室以及施药设备，占用空间大，工作周期较长。杀菌剂根据其防治原理可以分为化学保护、化学治疗以及化学免疫三大类型。这种作用原理的确定也必须以盆栽试验为基础进行研究，所以，活体试验是目前在杀菌剂研究和筛选中使用的主要技术。农药生物评价技术报告会五、除草剂生物测定技术与方法除草剂的生物测定方法有关文献报道很多。主要是利用活的生物体（植物、单细胞藻类或微生物等）或其器官、组织、细胞等在生长、形态以及生理等方面对化学物质的反应来确定除草活性的有无和大小。除草剂的生测方法很多，并不断有新的方法被建立。其应用也非常广泛，常用的主要是新除草剂筛选：除草剂作用特性（选择性、杀草普、土壤吸附、淋溶、光解、挥发、持效、残留等）研究：除草剂定性、定量分析（尤其适用于超高效除草剂研究或缺乏精密仪器等测试条件的基层单位）：除草剂作用方式研究以及除革剂药害研究等。一般来说，除草剂生测方法专～性较强，不同方法测定内容和应用范围不同；试验周期较长，费时，一般需３～７天，盆栽试验则需要１５～３０天或更长；对测试环境条件、光、温度、湿度、土壤特性等要求较严；对药剂的纯度以及助剂等也有较严格的要求。Ｉ．除草剂生测靶标的选择和培养除草剂生测靶标试材的选择范围很广，根据测定药剂以及研究目的不同，可以选择相应的靶标生物或其组织、细胞或细胞器（线粒体、质体等）。从真菌、藻类、苔藓等低等植物到杂草、栽培作物等，均可以作为除草剂生测靶标试材而使用。作为新化合物除草活性筛选靶标，最好选择生长迅速、代表性强、种子量大、无休眠习性、对光、温期不敏感、易于终年大量培养、对药剂反应敏感的试材进行试验。作为除草剂作用方式或特性研究，则应选择敏感性高，反应稳定的试材进行测定。应用范围以及禁用对象的研究则应选择大面积栽培的作物以及当地的主要品种进行试验。农药室内生物测定技术与方法张宗俭目前常用的除草剂生测的代表性靶标杂草名称科名种名学名苹科芷Ｍａｒｓｉｌｅａｑｕａｄｒｉｆｏｌｉａ蓼科卷茎蓼Ｐｏｉｙｇｏｎｕｍｃｏｎｖｏｌｖｕｌｕｓ红蓼Ｐ．ｏｒｉｅｎｔａＩｅ齿果酸膜Ｒｕｍｅｘｄｅｎｔａｔｕｓ藜科篓ＣｈｅｎｏｐｏｄｉｕｉＲａｌｂｕｍ地肤Ｋｏｃｈｉａａｌｂｕｍ苋科反枝苋Ａｍａｒａｎｔｈｕｓｒｅｔｒｏｆ］ｅｘｕｓ石竹科蘩缕ｓｔｅ｜ｉａｒｉａｍｅｄｉａ十字花科荠菜Ｃａｐｓｅ］］ａｂｕｒｓａ－ｐａｓｔｏｒｉｓ独行菜Ｌｅｐｉｄｉｕｍａｐｅｔａｌｕｍ豆科田皂角Ａｅｓｃｈｙｎｏｍｅｎｅｉｎｄｉｃａ大巢菜Ｖｉｃｉａｓａｔｉｖａ锦葵科苘麻Ａｂｕｔｉｌｏｎｔｈｅｏｐｈｒａｓｔｉ旋花科田旋花Ｃｏｎｖｏｌｖｕｌｕｓａｒｖｅｎｓ］ａ圆叶牵牛Ｐｈａｒｂｉｒｉｓｐｕｒｐｕｒｅａ茄科龙葵ＳＯＩａｎｕｍｎｉｇｒｕｍ曼陀罗肪ｔｕｆａｓｔｒａｍｏｎｉｕｍ玄参科婆婆纳Ｖｅｒｏｎｉｃａｄｉｄｙｍａ茜草科猪殃殃白ｌｉｕｍａｐａｒｉｎｅ菊科鬼针草Ｂｉｄｅｎｓｂｉｐｉｎｎａｔａ鳢肠Ｅｃｌｉｐｔａｐｒｏｓｔｒａｔａ苍耳ｘａｎｔｈｉｕｍｓｉｂｉｒｉｃｕｍ禾本科野燕麦ＡＶ￡＇ａａｆａ￡∞看麦娘Ａｌｏｐｅｃｕｒｕｓａｅｑｕａｌｉｓ马唐Ｄｉｇｉｔａｒｉａｓａｎｇｕｉｎａｌｉｓ稗草Ｅｃｈｉｎｏｃｈｌｏａｃｒｕｓ－ｇａｌｌｉ狗尾草Ｓｅｔａｒｉａｖｉ“ｄｉｓ假高粱Ｓｏｒｇｈｕｍｈａｌｅｐｅｎｓｅ莎草科香附子ＣｙｐｅｒｕｓＴＯｔｕｎｄｕｓ水莎草ＪｕｎｃｅｌＩｕｓｓｅｒｏｔｉｎｕｓ三棱草￥ｃｉｒｐｕｓｐｌａｎｉｃｕｌｍｉｓ达挝盈王丞塞：堡在塑揸差：除草剂生测试材中的作物靶标，应选择大面积栽培的、高纯度的主栽品种，要求种子成熟度好、发芽率高、萌发整齐一致，未经任何药剂处理的种子。杂草靶标试材最好能农药生物评价技术报告会人工种植栽培、统一采集、收藏。若无人工栽种条件。则需定期采收、清选、用物理方法（变温、层积、浓硫酸等）处理破除休眠后，在种子库内保存。要求发芽速度快、发整齐一致、易于培养。作物、杂草等的发芽、生长均需一定的水分、温度、氧气以及光照等条件，温室条件要求温度、湿度和光照均可人工控制，以便保证试材的正常生长及其生理状态的一致性。２．除草剂生物测定方法叠王莹筮测定鎏ｔ以指示植物种子在药剂处理后的萌发率或萌发后幼根、芽的伸长量或形态为指标进行测试。常用方法有：黄瓜幼苗形态法：（激素型除草剂）小杯法：（根、茎、胚轴伸长等，二苯醚、氨基甲酯、二硝基苯胺、酰胺类除草剂等）高粱法：（皿内法）：幼根、幼芽伸长萝ｈ子叶法等擅挂垒量量鉴室鎏；测定药剂处理（土壤、植株）后的植株生长量（高度、鲜重、干重、叶面积等），苗后茎叶处理剂以及光合抑制剂等常用方法。常用方法有：去胚乳小麦幼苗法（脲类、三氮苯类等）。番茄法（称量或目测再生根）。燕麦法（激素类）。菜豆叶片法。叶鞘漓注法等。生理堂拯测定法：处理后测分生组织的有丝分裂指数、光合、呼吸量、膜适性、酶活力、叶绿索、糖、蛋白等含量。评价活性大小。常用方法有：浮萍法农药室内生物测定技术与方法张宗俭单细胞藻法叶圆片漂浮法酶联免疫法光合呼吸仪测定法组织压片法等六、农药生物测定试验结果的评价及数据处理农药生测试验依据试验内容、性质以及所用靶标生物等的不同，药效结果的调查评价方法以及数据记录和处理方法等也不尽相同。但～般试验结果记录和评价多与空白对照进行比较，根据反应症状形态、死亡率、抑制程度等评价药效的高低。由于试验结果与药剂、靶标、测试条件等多种因素相关。故在记录和评价药效时，要有详细的试验原始记录，并随试验结果一起归档保存。１．原始记录的内容：原始记录应准确记载药剂的特性、剂型、含量、配制方法、生产厂家、生产日期、施药方法（施药器械、压力、喷头型号等）、靶标生育期、培养或饲养条件（温、湿、光等）、雾滴展布情况等基础数据。处理后的培养条件及管理方法，结果调查方法与调查结果等均应进行详细记录。所有原始记录均应一式两份，分别保存。２．试验结果的调查方法旦趔洼：目测估计处理后对试虫、病菌、杂草的杀伤或抑制效果的方法称目测法。目测法与计数或测量等定量调查方法相比，省工、省时，尤其是在试验处理数量大，或有害生物发生量大时，可以简化调查程序，综合评价处理的药效。在新农药筛选以及田间试验中被广泛应用，但目测法常因主观人为因素的影响和干扰较大，故应制订详细的调查标准，并采用多人评价，取其中间值等方法以减少试验的人为误差。农药生物评价技术报告会盐蓥垦鎏：直接计数调查药剂处理后，靶标试虫、病菌、杂草等的死亡数或减少数目，也可按一些相应的分级标准或调查指标进行计数，调查药剂的作用效果和影响程度。定量型量蓬：用仪器测量、计算药剂处理后靶标的重量（干重、鲜重）；大小或高度（株高、病斑或菌落直径、昆虫龄期变化等）；或测量一些生长、发育进程或生理生化指标等，以衡量药剂活性的有无和大小。３．数据处理和统计分析对于试验得到的大量数据，只有通过一定的处理和比较才能发现其内在关系与规律，正确阐述测定结果的科学性。统计分析是生物测定试验结果分析的重要工具，被广泛应用到药剂的毒力或药效比较之中。而其中最常用的是回归分析法、方差分析法、邓肯氏（Ｄｕａｃａａ）新复极差分析法、主因子分析法等。计算机的普及和应用使得数据处理和统计分析法的应用更加普遍和易于进行。农药室内生物测定技术与方法

作者：张宗俭作者单位：化工研究院农药生物测定中心被引用次数：1次

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