食品中沙门氏菌检测现状分析

作者：李惠静

来源：《现代食品》 2019年第9期

◎ 李惠静

(广西壮族自治区贺州市食品药品检验所,广西?贺州?542800)

Li Huijing

(Hezhou Institute for Food and Drug Control, Hezhou?542800, China)

摘?要:沙门氏菌是食品中一类较为常见的致病微生物。近年来世界各地发生过多起沙门氏菌食物中毒事件。因此,对食品中沙门氏菌的检测进行研究意义重大。本文对食品中沙门氏菌检测的传统方法、ELISA法、免疫荧光标记法、PCR法、电阻抗测定法以及生物发光法进行了系统分析,为更好地实施食品中沙门氏菌的检测提供依据。

关键词:食品;沙门氏菌;检测方法

Abstract:Salmonella is a relatively common pathogenic microorganism in food. In recent years, many Salmonella-related food poisoning incidents have occurred around the world. Therefore, research on the detection of Salmonella in food is of great significance. In this paper, the traditional methods of detection of Salmonella in food, ELISA, immunefluorescence labeling, PCR, electrical impedance measurement and bioluminescence were systematically analyzed, which provided a basis for better detection of Salmonella in food.

Key words:Food; Salmonella; Detection method

中图分类号:TS201.3

沙门氏菌是一类威胁人们健康的致病微生物。有数据表明[1],每年在发展中国家有超过2 000万人感染沙门氏菌。而其中通过食物感染的占绝大多数,因此研究食品中沙门氏菌的检测对强化食品安全、保障人们卫生健康具有十分重要的现实意义。基于此,本文对沙门氏菌的检测方法进行了系统分析。

1?传统方法(国家标准)

该方法属于培养方法,是对食品中的沙门氏菌进行增殖,从而提高检出率。具体来说主要包括3个步骤:①预增菌。把待检样品置于缓冲蛋白胨水中,进行前增菌,完成后再接到MM培养基或SC培养基上。②选择性增菌。该步骤使用的培养基包括亚硫酸铋琼脂平板和DHL、HE、WS琼脂平板。上述单一培养基都无法满足所有沙门氏菌血清型的需要,因此通常都会选择2种培养基进行检测。③分离。将选择性培养得到的菌落在含有非沙门氏菌抑制剂的培养基上培养,然后观察培养基上的菌落特征,进而鉴定出沙门氏菌。该方法整个检测过程需要一周左右,相对来说检测效率较低。

2?ELISA法

ELISA法是基于免疫学抗原-抗体特异性结合的检测方法。对沙门氏菌检测的检测范围较广泛、灵敏度较高。使用该方法检测沙门氏菌也需要对食品中的微生物进行增殖。黎兆滚首次利用该方法对动物食品中的沙门氏菌进行检测,在包被有沙门氏菌单克隆抗体的微量板上加入增菌后的食品样品,反应一段时间,再加入一定的指示剂,然后通过酶标仪测定OD值来判定结果[2]。

3?免疫荧光标记

该方法属于沙门氏菌检测中的一类新型免疫学检测法,主要是基于特异性抗体敏化的免疫色谱卡片。在具体操作中,仅需将增殖后的样品滴加到免疫色谱卡上,便能用肉眼直接观察结果。该方法操作便捷,无需其他设备辅助,具有较好的适应性。虽然同ELISA法一样需要进行沙门氏菌增殖,但增殖后的操作时间大概仅有10 min。

4?PCR法

PCR法是基于核酸的一类检测方法,任何一类生物都有特异性的核酸片段,通过含有探针的补体核酸片段进行检测,通常探针都含有放射性同位素。该方法的优点在于简便、快速、敏感性高和特异性强,目前已经得到了广泛应用[3]。例如,CocoinL L等用沙门氏菌invA基因寡聚核苷酸设计了一对引物,并进行沙门氏菌检测,其中被检的75份样品有13份呈阳性,该结果与传统方法的检测结果完全一致,说明PCR法能较好的实现对沙门氏菌的检测[4]。

5?电阻抗测定法

电阻抗测定法是新型生物学检测技术,目前在食品微生物检测领域有了较好的应用。其原理是细菌在培养基内生长繁殖过程中,会使培养基的阻抗发生变化,通过检测培养基的电阻抗变化情况,判定细菌在培养基中的生长繁殖特性。例如,Pless等分别用阻抗法和传统检测方法进行对照试验,对250种食品样品进行了检测。在122种沙门氏菌阳性样品中,用阻抗方法检出了119种,明显高于其他方法的检出率[5]。

6?生物发光法

生物学发光检测法的原理细菌细胞裂解时会释放出ATP,使用荧光虫素和荧光虫素酶可使之释放出能量,产生磷光,通过对磷光强度的检测实现对细菌菌落总数的判定。美国NHD公司推出的ATP食品细菌快速检测系统中的Profile-13560,能实现对多种食源性致病菌的检测,其中就包括沙门氏菌。

参考文献:

[1]李亚茹,周冬根,夏杏洲,等.免疫磁珠分离-实时荧光PCR快速检测虾中沙门氏菌[J].现代食品科技,2017,33(11):235-242.

[2]黎兆滚,陈博文.用ELISA法快速检测沙门氏菌[J].中国进出境动植检验,1997(3):34.

[3]吴家林,沙?丹,马广源,等.沙门氏菌LAMP检测方法的建立[J].中国病原生物学杂志,2015,10(7):611-614.

[4]Cocolin L,ManZhao M,Cantoh C,et al. Use of Polymerase Chain Reaction and Restriction Enzyme Analysis to DirectlyDetect and Identify Salmonella Typhimurium in Food[J].Journal Applied Microbiology,1998,85(4):673-677.

[5]Pless.Prodromidis development of an impedimetric immunosensor based on electro polymerized polytyramine films for the direct detection of Salmonella typhimurium in pure cultures of types trains and inoculated real samples[J].Anal Chimica Acta,2008,24(6):301-307.