病原性球菌及检验

病原性球菌及检验（一）

● 考点

葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属、奈瑟菌属 ﹥ 生物学性状 ﹥ 微生物学检查法

﹥ 临床意义（致病性、所致疾病） [

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【内容讲解】

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讲义编号NODE70103300130100000102：针对本讲义提问]

普及共性，单记个性 生物学性状

﹥ 形态与结构：革兰染色性，菌体形态，大小，排列状态，特殊结构。

﹥ 培养特性：对气体需求，营养要求，最适pH值，最适温度，在培养基中的生长现象。 ﹥ 生化反应：特殊生化。 ﹥ 抗原： ﹥ 分类： [

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致病性 ﹥ 致病物质 ﹥ 所致疾病

微生物学检查：针对生物学性状和致病性。 [

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一、葡萄球菌属

一群革兰阳性球菌，因常堆聚成葡萄串状而得名。 （一）生物学特性 1.形态与结构

G+，球形，0.5～1.5μm，呈葡萄串状成堆排列（在脓汁、肉浸液培养物中，可见单个，成对或短链排列），无鞭毛和芽胞

[讲义编号NODE70103300130100000105：针对本讲义提问]

2.培养特性

需氧或兼性厌氧，营养要求不高，最适pH为7.4，最适温度为35～37℃。 血琼脂平板：几乎所有的葡萄球菌可产生α、β、γ和δ溶血素。 液体培养基：生长迅速呈均匀混浊状。 3.生化反应 [

讲义编号NODE70103300130100000106：针对本讲义提问]

普皿：圆形、凸起、表面光滑湿润、边缘整齐并且不透明的菌落，直径为2～3mm。可产生不同的脂溶性色素，如金黄色、白

触酶试验（+）；多数能分解葡萄糖、麦芽糖及蔗糖，产酸不产气；分解甘露醇产酸、液化明胶和产生血浆凝固酶（多数致

4.抗原

（2）多糖抗原：是半抗原，具有型特异性，有三种：①A型多糖抗原；②B型多糖抗原；③C型多糖抗原。 5.分类

（1）《伯杰系统细菌学手册》 （2）古典分类法

（1）蛋白抗原：为完全抗原，有种属特异性，无型特异性。存在于葡萄球菌的表面，结合在细胞壁的粘肽部分，具有抗吞

6.抵抗力

对理化因素抵抗力强，耐热，耐干燥，耐高盐。 是抵抗力最强的无芽胞细菌。 [

讲义编号NODE70103300130100000107：针对本讲义提问]

（二）临床意义

葡萄球菌感染的特点是感染部位组织的化脓、坏死和脓肿形成。

金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌是引起临床感染最常见的葡萄球菌。 （1）金黄色葡萄球菌 致病物质：

血浆凝固酶；葡萄球菌溶血素；杀白细胞素；肠毒素；表皮溶解毒素；毒性休克综合征毒素。

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讲义编号NODE70103300130100000108：针对本讲义提问]

（2）表皮葡萄球菌

存在于皮肤的正常栖居菌，为医院感染的重要病原菌，它是导致血培养污染的常见细菌之一。 （3）腐生葡萄球菌

导致尿路感染的常见病原菌之一。 [

讲义编号NODE70103300130100000109：针对本讲义提问]

（三）微生物学检查

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讲义编号NODE70103300130100000110：针对本讲义提问]

标本采集（不同疾病采集不同标本）：

脓汁、渗出液、伤口分泌物、血液、尿液、粪便、痰液以及脊髓液等。

[

讲义编号NODE70103300130100000111：针对本讲义提问]

[

讲义编号NODE70103300130100000112：针对本讲义提问]

鉴定试验：

报告：检出“XXX葡萄球菌” [

讲义编号NODE70103300130100000113：针对本讲义提问]

耐药性检测 [

讲义编号NODE70103300130100000114：针对本讲义提问]

病原性球菌及检验（二）

二、链球菌属 （一）生物学特性 1.形态与染色

G+，圆形，0.8～1.0μm，呈链状排列（在液体培养基中易成长链。在脓汁标本中为短链，成双或单个散在）。 无鞭毛、无芽胞，某些菌株在血清肉汤中可有荚膜。 2.培养特性

液体培养基：溶血性菌株呈絮状或颗粒状沉淀生长。上层液体澄清，可有菌膜。不溶血菌株则均匀浑浊生长。 血琼脂平板：灰白色、圆形、凸起、细小菌落，不同溶血环。 [

讲义编号NODE70103300130200000101：针对本讲义提问]

检测耐甲氧西林的金葡菌（MRSA），耐甲氧西林的表葡菌（MRSE），耐万古霉素的金黄色葡萄球菌（VRSA），耐万古霉素的

大多为需氧或兼性厌氧菌，少数微需氧及专性厌氧。营养要求较高。最适温度为35～37℃，最适pH为7.4～7.6，在5%CO2

3.生化反应

触酶试验（-），能分解葡萄糖产酸不产气，对其他糖类的分解因不同菌株而异。

[讲义编号NODE70103300130200000102：针对本讲义提问] 4.分类 （1）根据溶血能力分类： ﹥ 甲型（α）溶血性链球菌：本菌为条件致病菌。 ﹥ 乙型（β）溶血性链球菌：该型细菌致病性最强，常引起人和动物多种疾病。 ﹥ 丙型（γ）链球菌：一般无致病性。 （2）根据链球菌细胞壁抗原（即C抗原）分类，即常用Lancefield血清分型法： 5.对理化因素的抵抗力 不强，对各种常用消毒剂敏感，60℃加热30分钟即可杀灭。 [讲义编号NODE70103300130200000103：针对本讲义提问] 将链球菌分为A.B.C.D„„T等18个群（其中I和J缺），对人类有致病性的90%属A群，B.C.D.G群链球菌感染较少见。 （二）临床意义 A群溶血性链球菌 致病物质 链球菌溶血素 透明质酸酶 链激酶，链道酶 致热外毒素 猩红热 变态反应性疾病 （风湿热，肾小球肾炎） 所致疾病 急性化脓性感染（丹毒、痈、蜂窝组织炎、咽炎、鼻窦炎、中耳炎、脑膜炎、产褥热M蛋白 [讲义编号NODE70103300130200000104：针对本讲义提问] 草绿色链球菌：属条件致病菌，常与亚急性心内膜炎相关。 B群链球菌：是新生儿肺炎、脑膜炎和败血症的病原体。 D群链球菌：引起呼吸道和泌尿道感染。 [讲义编号NODE70103300130200000105：针对本讲义提问]

（三）微生物学检查

标本采集（不同疾病采集不同标本）： 可采集脓汁、咽拭、痰、血、尿等标本。

[讲义编号NODE70103300130200000106：针对本讲义提问] 鉴定试验：

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讲义编号NODE70103300130200000107：针对本讲义提问]

三、肺炎链球菌 （一）生物学特性 1.形态与染色 2.培养特性

需氧或兼性厌氧；最适的温度为35～37℃；最适的pH 7.6～8.0；营养要求较高。

血琼脂平板：形成灰色扁平、中心凹陷（因菌落发酵所致）直径为0.5～1.0mm的菌落，周围有草绿色溶血圈。 液体培养基：均匀混浊。但培养时间过长，可因产生自溶，培养液可变澄清，管底沉淀。 3.生化反应

多数菌株分解菊糖、胆汁溶解试验阳性、Optochin敏感试验阳性。（肺炎链球菌与草绿色链球菌的鉴别）。 [

讲义编号NODE70103300130200000108：针对本讲义提问]

G+，球菌，呈矛尖状、钝面成双排列，有时呈短链状，0.5～1.25μm，有荚膜（在人或动物体内易形成），无鞭毛，无芽胞

（二）临床意义 致病物质：荚膜。

所致疾病：大叶性肺炎、支气管炎。可继发胸膜炎、脓胸，也可 引起中耳炎、鼻窦炎、脑膜炎及败血症。 [

讲义编号NODE70103300130200000109：针对本讲义提问]

（三）微生物学检查 1.标本采集 2.试验方法及鉴定

（1）直接涂片检查：经革兰染色，镜检见革兰阳性矛尖状双球菌。 （2）分离培养：

血液、脑脊液需增菌培养，呈均匀混浊，而且有绿色荧光。脓汁或脑脊液沉渣接种血琼脂，置5%～10%C02环境中培养。 （3）鉴定试验 1）胆汁溶解试验（+） 2）菊糖发酵试验（+） 3） 0ptochin敏感试验（+） 4）荚膜肿胀试验（+）

5）动物试验：小白鼠对肺炎链球菌极为敏感。 6）快速乳胶凝集试验（+） [

讲义编号NODE70103300130200000110：针对本讲义提问]

四、肠球菌属

肠球菌属是肠道的正常栖居菌。 （一）生物学形状 1.形态和结构

G+，成双或短链状排列的卵圆形球菌，无芽胞，无荚膜，部分肠球菌有稀疏鞭毛。 2.培养特性

营养要求高，需氧及兼性厌氧。在胆汁七叶苷和含6.5%NaCl培养基中可以生长（此点可与链球菌鉴别）。 血平板上主要表现为γ-和α-溶血。 3.生化反应

触酶（-），多数肠球菌能水解吡咯烷酮-β-萘基酰胺（PYR）。 [

讲义编号NODE70103300130200000111：针对本讲义提问]

与同科链球菌的显著区别：

能在高盐（6.5%NaCl）、高碱（pH9.6）、40%胆汁培养基上和10℃～45℃环境下生长；

对许多抗菌药物表现为固有耐药（如复方增效磺胺、头孢菌素、克林霉素和低浓度的氨基糖苷类）。 [

讲义编号NODE70103300130200000112：针对本讲义提问]

（二）临床意义

肠球菌是G菌中仅次于葡萄球菌属的重要医院感染病原菌。

最常见的为尿路感染，其次为腹部和盆腔等部位的创伤和外科术后感染。 临床上分离率最高的是粪肠球菌，其次是屎肠球菌。

+

肠球菌致病基因：主要有细胞溶解素激活基因、明胶酶基因、表面蛋白基因、胶原蛋白黏附素基因、聚集物质基因和粪肠球[

讲义编号NODE70103300130200000113：针对本讲义提问]

（三）微生物学检验

采集标本：如尿液、脓汁、胆汁、分泌物或血液等。

方法：以直接涂片进行初步检查。分离培养后，挑取可疑菌落，进行涂片、染色、镜检、触酶试验、胆汁七叶苷试验和6.5 （四）结果评价 （五）治疗原则

一般采用β-内酰胺类和氨基糖苷类联合治疗，氧氟沙星与氨苄西林有协同作用。必要时还要改用万古霉素或替考拉宁。 [

讲义编号NODE70103300130200000114：针对本讲义提问]

耐药性检测：一般要测试对β-内酰胺类尤其是青霉素类（如青霉素、氨苄西林）、万古霉素和氨基糖苷类（如庆大霉素）

药敏结果中必须注明β-内酰胺类（如青霉素G、氨苄西林）的敏感性。庆大霉素的耐药水平（是否为高水平耐药）万古霉素

五、奈瑟菌属

G，双球菌，无鞭毛，无芽胞，有菌毛。 专性需氧，氧化酶阳性。

本属主要有9个种。其中对人致病的是脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌。 脑膜炎奈瑟菌

简称脑膜炎球菌，是引起流行性脑脊髓膜炎（简称流脑）的病原体。 [

讲义编号NODE70103300130200000115：针对本讲义提问]

-

1.生物学特性 （1）形态与染色：

G-，菌体呈肾形，坦面相对，成对排列，0.6～1.5μm，在患者的脑脊液中位于中性粒细胞内。 （2）培养特性：

营养要求高，属苛养菌。最适温度为35～37℃，最适pH为7.4～7.6。 [

讲义编号NODE70103300130200000116：针对本讲义提问]

（3）生化反应：

绝大多数菌株能分解葡萄糖和麦芽糖，产酸不产气（因淋病奈瑟菌不分解麦芽糖，借此与之鉴别）； 不分解乳糖、甘露醇、半乳糖和果糖，硝酸盐还原试验阴性不分解尿素、不产生H2S和靛基质； 触酶试验阳性，氧化酶试验阳性。 （4）抗原及分型：

主要有四种抗原：荚膜多糖群特异性抗原、外膜蛋白型特异性抗原、脂多糖抗原及核蛋白抗原。 根据群特异性荚膜多糖抗原不同，将本菌分为A.B.C.D.X、Y、Z、1916、29E和W135等。 目前，对人致病的主要是A群，偶见B群、C群及1916群引起散发病例。 [

讲义编号NODE70103300130200000117：针对本讲义提问]

2.临床意义

致病物质：菌毛，荚膜，内毒素。 高峰。

所致疾病：脑膜炎奈瑟菌是流行性脑脊髓膜炎的病原菌。主要表现发热，皮肤瘀斑，脑膜刺激症状。存在于携带者或病人的

[讲义编号NODE70103300130200000118：针对本讲义提问]

3.微生物学检验

（1）标本采集：血液；瘀斑渗出液；脑脊液；鼻咽分泌物。

注：因本菌能产生自溶酶，易自溶，故采集的标本不宜置冰箱，应立即送检。 （2）检验方法及鉴定：

1）直接涂片检查：取脑脊液离心后沉淀物涂片或刺破瘀斑血印片，干燥固定后革兰染色。若发现中性粒细胞内（或胞外）齐、直径1～2mm的小菌落。 3）鉴定：

①细菌染色形态： G-，菌体呈肾形，坦面相对，成对排列。 ②氧化酶试验（+） ③触酶试验（+）

④分解葡萄糖、麦芽糖产酸不产气 ⑤荚膜多糖抗原直接凝集试验 [

讲义编号NODE70103300130200000119：针对本讲义提问]

2）分离培养：将标本增菌培养液直接接种于血琼脂平板、巧克力琼脂或EPV琼脂，置5%～10%C02环境中，35℃培养18～2

4.治疗原则：

青霉素G为首选，三代头孢对脑膜炎奈瑟菌也具有很强的抗菌活性。青霉素过敏的病人可考虑选用三代头孢或氯霉素。 淋病奈瑟菌

简称淋球菌，是淋病的病原体，人类是其唯一的天然宿主和传染源。 1.生物学特性 （1）形态与染色： 和鞭毛。

（2）培养特性：

菌落：表面光滑、凸起、半透明、高亮度、直径0.5～1.0mm的圆形菌落。 [

讲义编号NODE70103300130200000120：针对本讲义提问]

G-，球形或肾形，成对排列，0.6～0.8μm。在脓汁标本中，通常位于中性粒细胞内，而在慢性淋病时常位于细胞外。从患

营养要求较高，国内常用血液琼脂、巧克力琼脂、EPV琼脂等培养基。最适pH为7.5，最适温度为35～37℃。初次分离时，

（3）生化反应：

对糖类生化活性最低，本菌可发酵葡萄糖、产酸，但不酵解麦芽糖（常借此与脑膜炎奈瑟菌相鉴别）。 氧化酶和触酶试验均阳性。 （4）主要抗原：

菌毛蛋白抗原、脂多糖抗原和外膜蛋白抗原。 （5）抵抗力：对外界抵抗力极低。 [

讲义编号NODE70103300130200000121：针对本讲义提问]

2.临床意义： 3.微生物检验

（1）标本采集：脓性分泌物，尿道拭子，宫颈口分泌物，眼结膜分泌物，血液。 （2）检验方法及鉴定

淋病奈瑟菌是常见的性传播疾病淋病的病原菌，主要通过性接触直接侵袭感染泌尿生殖道，口咽部及肛门直肠的黏膜。如单

1）直接涂片检查：收集标本后立即涂片、革兰染色，镜检时见中性粒细胞内数对革兰阴性双球菌，可初诊。 2）分离培养：细菌培养仍是目前世界卫生组织推荐的筛选淋病患者的唯一方法。 及时接种含有两种以上抗生素（万古霉素和多黏菌素等）的营养培养基上。 3）鉴定：

①生化反应：氧化酶阳性，仅分解葡萄糖产酸；不发酵麦芽糖与蔗糖，30%H2O2试验阳性可与脑膜炎奈瑟菌等相鉴别。 ②免疫学方法：荧光抗体染色法、协同凝集试验。 ③核酸探针杂交法。 [

讲义编号NODE70103300130200000122：针对本讲义提问]

六、卡他布兰汉菌

﹥ G，双球菌，约0.6～1.0μm，无芽胞，无鞭毛。

﹥ 氧化酶和触酶阳性，产DNA酶，大部分菌株还原硝酸盐和亚硝酸盐，借此可与奈瑟菌属相鉴别。 ﹥ 可致中耳炎、鼻窦炎、肺炎。 [

讲义编号NODE70103300130200000123：针对本讲义提问]

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﹥ 营养要求不高，在普通培养基上18～20℃即可生长，借此可与脑膜炎奈瑟菌鉴别。需氧，菌落光滑，直径约1～3mm，不

【例题】SPA是

A.肠杆菌科的细菌的抗原 B.葡萄球菌细胞壁的蛋白成分 C.沙门菌的表面抗原 D.核蛋白抗原

E.链球菌属表面抗原

[讲义编号NODE70103300130200000124：针对本讲义提问]

【例题】鉴别肺炎链球菌与甲型溶血性链球菌可用 A.外斐试验 B.肥达试验

C.乳糖发酵试验 D.菊糖分解试验 E.血浆凝固酶试验

[讲义编号NODE70103300130200000125：针对本讲义提问]

【例题】B群链球菌不引起下列哪种疾病 A.败血症 B.肺炎 C.脑膜炎 D.咽喉炎 E.风湿热

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讲义编号NODE70103300130200000126：针对本讲义提问]

【例题】引起剥脱性皮炎的细菌是 A.肺炎球菌 B.链球菌

C.金黄色葡萄球菌 D.脑膜炎奈瑟菌 E.肠球菌

[讲义编号NODE70103300130200000127：针对本讲义提问]

【例题】淋病奈瑟菌与脑膜炎奈瑟菌鉴别用 A.葡萄糖发酵试验 B.麦芽糖发酵试验 C.氧化酶试验 D.触酶试验 E.革兰染色

[讲义编号NODE70103300130200000128：针对本讲义提问]

【例题】一位老年患者因外伤住院治疗，插导尿管一周后出现尿路感染。取尿液检查，革兰染分离培养营养要求较高，血培养生长较好，有甲型溶血；触酶阴性，药敏试验对第三代头孢菌素碱（Ph 9.6）、高胆汁（40%）培养基上生长。此菌为 A.大肠埃希菌 B.草绿色链球菌 C.表皮葡萄球菌 D.肠球菌

E.肺炎链球菌

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讲义编号NODE70103300130200000129：针对本讲义提问]

【例题】初步鉴定B群链球菌的试验为 A.马尿酸钠水解试验 B.CAMP试验

C.杆菌肽敏感试验 D.胆汁七叶苷试验 E.Optochin敏感试验

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讲义编号NODE70103300130200000130：针对本讲义提问]

【例题】区分葡萄球菌属和链球菌属的试验的是 A.VP试验 B.吲哚试验 C.氯化钾试验 D.硝酸盐还原试验 E.触酶试验

[讲义编号NODE70103300130200000131：针对本讲义提问]

【例题】关于肺炎链球菌，叙述不正确的是 A.革兰染色阴性 B.革兰染色阳性

C.荚膜肿胀试验可作为快速诊断 D.主要引起大叶性肺炎 E.可引起菌血症

[讲义编号NODE70103300130200000132：针对本讲义提问]

【例题】关于脑膜炎奈瑟菌，叙述不正确的是

A.镜下呈肾形或豆形成双排列、坦面相对的革兰阴性球菌，具有荚膜 B.本菌经空气传播，定植于人的脑皮质部位 C.本菌是流行性脑脊髓膜炎的病原菌 D.人类是脑膜炎奈瑟菌的唯一宿主

E.本菌对外界环境的抵抗力弱，易自溶

[讲义编号NODE70103300130200000133：针对本讲义提问]