肝细胞和巨噬细胞共培养中的肝细胞应该选择哪
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肿瘤相关巨噬细胞的诱导、鉴定及其对肝癌细胞的影响肝癌是经典的炎症相关性肿瘤,肝癌细胞所在微环境内浸润着大量肿瘤相关巨噬细胞,并以M2型肿瘤相关巨噬细胞为主。本部分研究旨在通过体外诱导获得不同活化状态巨噬细胞并明确其对肝癌细胞生物学行为的影响。我们首先通过人单核白血病细胞THP-1经佛波酯诱导为未分化巨噬细胞(UM0),再分别经脂多糖,白介素4和13诱导获得经典活化的巨噬细胞M1及选择性激活的巨噬细胞M2;然后通过形态学、荧光定量PCR和ELISA对其表型进行鉴定;最后从增殖、迁移及侵袭实验探索不同活化状态巨噬细胞条件培养基(conditioned medium,CM)对肝癌细胞生物学行为的影响,并检测了肝癌细胞中上皮-间质化转换(EMT)标志物的变化。结果显示:(1)与UM0相比,M1呈长梭形或多边形,TNF-α和CCL3 m RNA的表达量及IL-12的分泌均明显升高;M2伪足细长而杂乱、呈抱团式生长,AMAC-1、CCL22和Arg-1 m RNA的表达量及IL-10的分泌均显著增加。该检测结果与文献报道的结果一致,说明已成功诱导获得不同活化状态的巨噬细胞;(2)生物学功能实验显示经M2CM处理后的肝癌细胞与对照组相比,其增殖、迁移和侵袭能力均显著增强,而M1CM处理的肝癌细胞则无明显变化
