发布网友 发布时间:2024-10-24 17:28
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热心网友 时间:2024-10-31 02:25
茯苓母种培养基的配制及原种和栽培种的制备
1. 母种的培养基配制
- 采用马铃薯-琼脂培养基,配方包括:马铃薯250克,蔗糖50克,琼脂20克,尿素3克,水1000毫升。
- 按照常规方法配制,调整pH至6-7,分装到试管中,包扎并灭菌,制作成斜面培养基。
- 选择成熟的茯苓菌核,洗净后用75%酒精冲洗,再用蒸馏水或冷开水清洗多次,擦干后切开,取白色菌肉接种到培养基斜面上。
- 放入25-30℃的恒温箱或培养箱中培养5-7天,直至菌丝长满斜面,即可得到纯种。
2. 原种的培养
- 母种成功培养后,需扩大繁殖以制备原种。
- 原种培养基配方:小松木块55%,松木屑20%,米糠或麦麸20%,蔗糖4%,石膏粉1%。
- 配制方法:先将木屑、米糠、石膏粉混合,再将蔗糖加水溶解,加入松木块煮沸30分钟,捞出松木块后,将木屑、米糠、石膏粉倒入糖液中混合,最后加入木块拌匀,装入500毫升广口瓶中,灭菌后冷却即可接种。
- 接种方法:在无菌条件下,从母种中取出黄豆大小的菌种,放入原种瓶进行接种。
3. 栽培种的培养
- 栽培种培养基配方:木块66%,松木屑10%,麦麸或细糠21%,葡萄糖2%,石膏粉1%,尿素0.4%,过磷酸钙1%,加适量水,pH值调至5-6。
- 配制方法与原种相同。
- 将原种中的菌丝接种到装有栽培料的广口瓶中,大约30天后菌丝会布满瓶体。
- 一瓶斜面纯种可制备5-8瓶原种,一瓶原种可制备60瓶栽培种,一瓶栽培种可接2-3窖茯苓。